38. Jika suatu analit yang terdiri dari campuran metil merah dan metil oranye dipisahkan menggunakan kromatografi kolom, maka untuk mengelusi metil merah digunakan fase gerak __ A. Etanol: asam asetat glasial B. Metanol C. Eter: asam sulffat D. HCl 0,1 N 39. Kadar metil merah dan metil oranye yang dihasilkan dari kromatografi kolom dapat diketahui dengan mengukur absorbansinya pada panjang gelombang tertentu, yaitu __ untuk metil merah dan __ untuk metil oranye. A. 350 nm dan 400 nm B. 430 nm dan 485 nm C. 490 nm dan 500 nm D. 510 nm dan 550 nm 40. Komponen utama pada HPLC yang paling penting dalam proses pemisahan koponen sampel adalah __ A. Pompa. B. Kolom C. Injektor D Detektor 41. Fas gerak dalam HPLC harus berupa pelarut,buffer, ataupun reagen dengan tingkat kemurnian yang sangat tingg yaitu __ A. Analytical Grade B. Technical Grade C. HPLCGrade D. Laboratory Grade 42. System fase gerak (eluen) dalam HPLC dengan komposisi pelarut yang tidak berubah (tetap) selama proses kromatografi disebut . __ A. Isokratik B. Gradien C. Fase normal D. Fase terbalik 43. Apa peran detektor UV-Vis dalam sistem HPLC? A. Menyuntikkan sampel ke dalam kolom B. Memisahkan komponen berdasarkan sifat polaritasnya C. Mendeteksi dan mengukur intensitas komponen berdasarkan serapan cahaya pada panjang gelombang tertentu D. Mengontrol laju alir fase gerak.

38. **Jawaban: A. Etanol: asam asetat glasial**Metil merah dan metil oranye adalah indikator asam-basa. Metil merah memiliki sifat lebih asam dibandingkan metil oranye. Campuran etanol dan asam asetat glasial akan memberikan fase gerak yang lebih polar, sehingga metil merah (yang lebih polar) akan terelusi lebih cepat. Pilihan lain kurang tepat karena kurang polar atau bersifat terlalu asam/basa yang dapat merusak senyawa.39. **Jawaban: D. 510 nm dan 550 nm**Metil merah memiliki panjang gelombang maksimum absorbansi sekitar 510 nm, sedangkan metil oranye sekitar 550 nm. Nilai-nilai ini dapat sedikit bervariasi tergantung pada pelarut.40. **Jawaban: B. Kolom**Kolom adalah jantung dari sistem HPLC. Pemisahan komponen sampel terjadi di dalam kolom berdasarkan interaksi antara analit dengan fase diam dan fase gerak. Komponen lain penting, tetapi kolom menentukan kualitas pemisahan.41. **Jawaban: C. HPLC Grade**HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) membutuhkan kemurnian pelarut yang sangat tinggi untuk mencegah interferensi dan memastikan hasil yang akurat. HPLC Grade menjamin kemurnian yang sesuai untuk aplikasi HPLC.42. **Jawaban: A. Isokratik**Sistem isokratik menggunakan komposisi fase gerak yang konstan sepanjang proses kromatografi. Sistem gradien, sebaliknya, mengubah komposisi fase gerak selama proses.43. **Jawaban: C. Mendeteksi dan mengukur intensitas komponen berdasarkan serapan cahaya pada panjang gelombang tertentu**Detektor UV-Vis dalam HPLC mengukur absorbansi cahaya UV-Vis oleh komponen yang terelusi dari kolom. Intensitas absorbansi berbanding lurus dengan konsentrasi komponen tersebut.